前兩天小編給大(da)家講解了臺式(shi)高速(su)離心機密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)離心法和梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)介質的(de)(de)回收，為了讓大家對此(ci)問題(ti)認(ren)識更全面(mian)，今天給大家科普下(xia)(xia)密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)溶液(ye)(ye)(ye)(ye)的(de)(de)配(pei)(pei)制方法。配(pei)(pei)置密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)溶液(ye)(ye)(ye)(ye)，一(yi)般情(qing)況下(xia)(xia)是先配(pei)(pei)制高濃度(du)(du)(du)(du)(du)儲備液(ye)(ye)(ye)(ye)，再用(yong)緩(huan)沖液(ye)(ye)(ye)(ye)稀釋到(dao)需要的(de)(de)濃度(du)(du)(du)(du)(du)，階梯(ti)(ti)(ti)梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)配(pei)(pei)制若干(gan)個(ge)不同(tong)密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)溶液(ye)(ye)(ye)(ye)，連(lian)續梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)一(yi)般配(pei)(pei)制兩種(zhong)密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)溶液(ye)(ye)(ye)(ye)，其中一(yi)種(zhong)是梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)大密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)，另一(yi)種(zhong)是梯(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)小密(mi)度(du)(du)(du)(du)(du)。

  用(yong)各種離心(xin)(xin)機轉(zhuan)子在梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)介質中分(fen)離顆粒時(shi)，使用(yong)兩種形(xing)(xing)式的(de)(de)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)，即(ji)自(zi)(zi)形(xing)(xing)成梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)和預(yu)形(xing)(xing)成梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。自(zi)(zi)形(xing)(xing)成梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)是(shi)(shi)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)介質在離心(xin)(xin)場作(zuo)用(yong)下顆粒重新分(fen)布(bu)，形(xing)(xing)成從頂部到(dao)底部逐漸增(zeng)加密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)液柱。預(yu)形(xing)(xing)成梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)是(shi)(shi)指(zhi)(zhi)在離心(xin)(xin)之(zhi)前，用(yong)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)形(xing)(xing)成儀或人工的(de)(de)方法預(yu)先制備密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)柱。按照梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)結構可(ke)分(fen)為不(bu)連(lian)續(xu)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)（即(ji)階梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)）和連(lian)續(xu)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)兩種類型(xing)。連(lian)續(xu)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)又有線性梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)、指(zhi)(zhi)數梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)、對數梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)和復(fu)合梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。有時(shi)為了速率區帶離心(xin)(xin)分(fen)離的(de)(de)方便，又設計了等(deng)動力梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)，為了防止在區帶轉(zhuan)子中的(de)(de)徑向稀釋，設計了等(deng)體積(ji)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)。配(pei)置密度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)梯(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)度(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)(du)溶液需要(yao)注意很多事項(xiang)。

  堿金屬鹽溶(rong)液(ye)(ye)在4℃下(xia)可(ke)以長期保存，但含碘(dian)的物質應避光保存，多(duo)元(yuan)醇(chun)易受微生物污染，保存在-20℃使用(yong)時不(bu)方(fang)便。好臨時配置。有(you)些(xie)使用(yong)冷凍離(li)心(xin)機(ji)進行(xing)離(li)心(xin)需要(yao)在無菌條件下(xia)進行(xing)，但高(gao)壓消毒(du)對有(you)些(xie)梯度(du)介質會帶來一(yi)些(xie)不(bu)利影響，如引起Percoll顆(ke)粒(li)不(bu)穩(wen)定(ding)，配制時可(ke)只對稀釋劑(ji)進行(xing)消毒(du)，碘(dian)化梯度(du)介質中只有(you)Metrizamide可(ke)以進行(xing)高(gao)壓消毒(du)。溶(rong)解多(duo)糖是先(xian)給(gei)粉(fen)劑(ji)里加(jia)入少許水攪拌，使之成為(wei)半透明的糊狀(zhuang)，再稀釋到(dao)所需體積。如果直接把大量(liang)水或(huo)(huo)緩沖液(ye)(ye)加(jia)到(dao)多(duo)糖粉(fen)劑(ji)里，會形成大量(liang)凝(ning)塊(kuai)。可(ke)用(yong)比重(zhong)瓶或(huo)(huo)折射儀測定(ding)梯度(du)溶(rong)液(ye)(ye)的密度(du)和所有(you)介質的密度(du)分(fen)布，用(yong)下(xia)述方(fang)程能(neng)快速地根據折射率計算溶(rong)液(ye)(ye)的密度(du)：

ρ=An-B 
式中，A和B的值隨著梯度介質和溫度的變化而不同，如用0.8% NaCl、120mmol/L Tricine-NaOH配制的等滲Iodixanol梯度中，A=3.2984，B=3.3967。

儲存液與稀釋(shi)劑間通過混(hun)合(he)得到的溶(rong)液密度可(ke)用下式計(ji)算(suan)：

式中，D為所需密度；V為儲存液的體積；d為儲存液的密度；V1為稀釋液的體積；d1為稀釋液的密度。
  經過小編的講解，大家是否清楚了蜀科臺式高速離心機密(mi)度梯度溶液的(de)配(pei)制(zhi)方法(fa)，后續更(geng)多(duo)離心機知識請關注蜀科公眾號(hao)：shukeyiqi，或者登陸我們的(de)查看。