β—胡(hu)蘿卜素是(shi)(shi)一種(zhong)抗(kang)氧化(hua)劑，具有(you)解(jie)毒作(zuo)用，是(shi)(shi)維護人(ren)體健(jian)康*的(de)營(ying)養素，在抗(kang)癌、預防心血(xue)管疾病(bing)、白內障及抗(kang)氧化(hua)上有(you)顯著(zhu)的(de)功能，并進而防止老化(hua)和衰老引(yin)起(qi)的(de)多種(zhong)退(tui)化(hua)性(xing)疾病(bing)。蜀科低速冷凍離心(xin)機可以有效分(fen)(fen)離(li)β-胡(hu)蘿卜素，是各科研機(ji)構和生物公(gong)司(si)開展研究、生產的好幫手(shou)。接下來小編為大家介紹分(fen)(fen)離(li)的過程。

  葉(xie)綠(lv)(lv)(lv)素(su)廠在提取葉(xie)綠(lv)(lv)(lv)素(su)后的廢(fei)液小含有一(yi)定量胡(hu)(hu)蘿(luo)(luo)卜(bu)(bu)(bu)(bu)素(su)，而且由于(yu)葉(xie)綠(lv)(lv)(lv)素(su)被提取，在利用離心(xin)機分(fen)離胡(hu)(hu)蘿(luo)(luo)卜(bu)(bu)(bu)(bu)素(su)時．可(ke)以減少葉(xie)綠(lv)(lv)(lv)素(su)對胡(hu)(hu)蘿(luo)(luo)卜(bu)(bu)(bu)(bu)素(su)的干擾。因(yin)此，這(zhe)是(shi)比較好的提取胡(hu)(hu)蘿(luo)(luo)卜(bu)(bu)(bu)(bu)素(su)的原料。胡(hu)(hu)蘿(luo)(luo)卜(bu)(bu)(bu)(bu)素(su)常用的分(fen)離方法是(shi)氧化(hua)鋁柱層析。

1．廢液的預處理
  取葉綠素廠廢液5mL于離心管中，置于蜀科低速(su)冷凍離(li)心機中(zhong)，進行(xing)平衡(heng)操作后，1000 r/min離心(xin)15min。取上(shang)層黃色液體于50ml梨形分液漏斗中(zhong)。加(jia)25ml石油醚(沸程(cheng)為30一60℃)，充(chong)分混勻(yun)。

2．氧化鋁層析(xi)柱的(de)準備(bei)

  取100g氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)于(yu)灰(hui)化爐(lu)中加熱400℃，保持3h，使水分*蒸發成(cheng)活(huo)性(xing)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)。此時(shi)的(de)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)為Ⅰ級，適(shi)當(dang)吸收空氣中的(de)水分(約3％)后(hou)，成(cheng)Ⅱ級，然(ran)后(hou)，用(yong)(yong)石油(you)(you)醚將(jiang)活(huo)性(xing)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)調制成(cheng)糊(hu)(hu)狀(zhuang)，備用(yong)(yong)。另取1支20 mm×300 mm的(de)玻璃(li)層(ceng)(ceng)析(xi)(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)，關(guan)閉閥(fa)門，加入三分之一體積的(de)石油(you)(you)醚、再將(jiang)糊(hu)(hu)狀(zhuang)的(de)話性(xing)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)慢慢地(di)加入到玻璃(li)層(ceng)(ceng)析(xi)(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)中，同時(shi)打開層(ceng)(ceng)析(xi)(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)的(de)閥(fa)門，讓其中的(de)石油(you)(you)醚慢慢地(di)流出(chu)，有利于(yu)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)的(de)沉(chen)降。當(dang)氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)裝(zhuang)層(ceng)(ceng)析(xi)(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)的(de)8D％時(shi)，停止加氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)，待氧(yang)(yang)(yang)(yang)化鋁(lv)*沉(chen)降。

3．加樣層析(xi)和洗脫

  裝好(hao)(hao)層析(xi)柱(zhu)，同時(shi)打開層析(xi)柱(zhu)的(de)閥(fa)門(men)和分液(ye)漏斗(dou)(dou)(dou)(dou)(dou)的(de)閥(fa)門(men)，使分液(ye)漏斗(dou)(dou)(dou)(dou)(dou)中的(de)樣(yang)(yang)品慢(man)慢(man)地(di)加(jia)入到(dao)氧(yang)化(hua)鋁層析(xi)柱(zhu)中。觀(guan)察氧(yang)化(hua)鋁由(you)于加(jia)入樣(yang)(yang)品后(hou)顏色(se)(se)的(de)變化(hua)。當(dang)前沿的(de)顏色(se)(se)伸展柱(zhu)高度(du)的(de)二分之(zhi)一時(shi)，關閉分液(ye)漏斗(dou)(dou)(dou)(dou)(dou)和層析(xi)柱(zhu)的(de)閥(fa)門(men)，停(ting)止加(jia)樣(yang)(yang)。另取1個250mL分液(ye)漏斗(dou)(dou)(dou)(dou)(dou)，內裝石油醚:丙酮(tong)＝9:l的(de)混合溶液(ye)作為洗(xi)脫劑，安(an)裝好(hao)(hao)層析(xi)裝置，分別打開分液(ye)漏斗(dou)(dou)(dou)(dou)(dou)和層析(xi)柱(zhu)的(de)閥(fa)門(men)，讓(rang)洗(xi)脫劑慢(man)慢(man)流(liu)經層析(xi)柱(zhu)。當(dang)顏色(se)(se)前沿到(dao)達層祈柱(zhu)底部時(shi)，注意觀(guan)察并(bing)記(ji)錄色(se)(se)帶(dai)的(de)分離情況。*條(tiao)帶(dai)(從底部往(wang)上(shang)數)，是α-胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)，第(di)二條(tiao)帶(dai)是β-胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)，第(di)三(san)條(tiao)帶(dai)是γ—胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)，再往(wang)上(shang)是其(qi)他類胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)及其(qi)他色(se)(se)素(su)(su)。本實驗(yan)要求收集β-胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)組分。用50mL燒杯(bei)收集β-胡(hu)蘿(luo)卜(bu)(bu)素(su)(su)洗(xi)脫液(ye)。

4.沉淀

  將洗脫液于50℃水浴中加熱使溶劑揮發．然后，在殘留物中加lv仿使之溶解后再用乙醇沉淀，如發現有白色沉淀物質產生，還需用蜀科低速冷凍離心機，控制轉速在2000r/min狀態下進行離心將其去除。在上清液中再加乙醇，得到的棕褐色沉淀，即為β-胡蘿卜素。稱量，記錄總重量。
  蜀科低速冷(leng)凍離心機使用(yong)非(fei)常廣泛(fan)，了解更(geng)多應(ying)用(yong)案例，請繼續關注蜀科儀器相關。