要想深挖(wa)外(wai)泌(mi)體(ti)的潛能(neng)，使(shi)其發揮更(geng)大的作用，必先獲得高純度(du)、內含物少丟失的外(wai)泌(mi)體(ti)樣(yang)本。小編為大家(jia)介紹一種快速(su)并分離外(wai)泌(mi)體(ti)的方法——蜀科實驗室離心機分離法。
 

超速離(li)(li)心法是常用的(de)外(wai)(wai)泌體純化手(shou)段，在以蜀科(ke)低速離(li)(li)心機離(li)(li)心除(chu)去掉死亡(wang)細(xi)胞和(he)細(xi)胞碎(sui)片(pian)后(hou)，就通過蜀科(ke)高速離(li)(li)心機將大小相同的(de)囊泡顆粒從可溶(rong)性分子如游(you)離(li)(li)蛋(dan)(dan)(dan)白質和(he)蛋(dan)(dan)(dan)白質復合物(wu)中沉淀并純化出來。重(zhong)要(yao)的(de)是，隨后(hou)要(yao)用PBS或新鮮生長培(pei)養基(ji)少一次的(de)清洗外(wai)(wai)泌體，從而來減(jian)少其中游(you)離(li)(li)的(de)殘(can)存蛋(dan)(dan)(dan)白。此外(wai)(wai)，所有離(li)(li)心步(bu)驟必(bi)須在4°C下進行，借此來保持蛋(dan)(dan)(dan)白酶、DNase和(he)RNases處于非(fei)活性狀態，也(ye)就是必(bi)須使用蜀科(ke)的(de)冷凍實驗室離心(xin)機(ji)。

通常(chang)超速離心也會與蔗(zhe)糖(tang)密度梯度（其密度從(cong)低(di)到高的連(lian)續分布）或蔗(zhe)糖(tang)墊（30% sucrose cushion）組合使用，即在離心機中(zhong)以(yi)100,000-200,000 x g離心沉淀(dian)（含有外泌體）120分鐘，可使樣(yang)品中(zhong)的外泌體應將以(yi)1.13-1.19g/mL的蔗(zhe)糖(tang)密度范(fan)圍內進行富集。

盡管這種強強聯手的方法可以獲得高度純化的外泌體，但也存在一些缺點。確實，超速離心的過程耗時耗力，且需要耗費大量的原料。而大的缺陷在于重復離心操作很有可能對外泌體的囊泡造成損害從而降低其質量，又或者樣品中的可溶性蛋白可能與外泌體一起形成聚集體和團塊進而產生污染。

蜀科實驗室離(li)心機可以幫助大家獲得外泌體，而外泌體到(dao)手后要如(ru)何發光(guang)發熱，有興趣的朋友可以關(guan)注(zhu)我們的公(gong)眾號(hao)：“shukeyiqi”來蜀科(ke)小編，我們可以為您(nin)提供(gong)數據庫，助您(nin)一臂(bei)之力(li)。