摘要：研究(jiu)丹參酮(tong)IIA、隱丹參酮和丹參酮I組合(he)物(wu)（組合(he)物(wu)）在(zai)斑馬魚體內的代(dai)謝，探(tan)討斑馬魚用于中藥多組分代(dai)謝研究的可行性及(ji)合(he)理性。

方法

2.1分組與給藥

取斑馬魚(yu)(yu)成(cheng)(cheng)魚(yu)(yu)，平均分(fen)(fen)成(cheng)(cheng)2組(zu)(zu)，每組(zu)(zu)5條，分(fen)(fen)別置(zhi)于30 mL含(han)有1% DMSO純凈(jing)水（空(kong)白(bai)魚(yu)(yu)組(zu)(zu)）、含(han)丹(dan)參(can)(can)酮IIA、隱丹(dan)參(can)(can)酮和丹(dan)參(can)(can)酮I組(zu)(zu)合(he)物(wu)（丹(dan)參(can)(can)酮IIA、隱丹(dan)參(can)(can)酮、丹(dan)參(can)(can)酮I質量濃度分(fen)(fen)別為1.57、1.02、2.09μg/mL）的1% DMSO純凈(jing)水溶(rong)液（給藥(yao)魚(yu)(yu)組(zu)(zu)）棕(zong)色瓶中(zhong)，同時設空(kong)白(bai)藥(yao)物(wu)組(zu)(zu)（組(zu)(zu)合(he)物(wu)1% DMSO純凈(jing)水溶(rong)液）。

2.2樣品采(cai)集與(yu)處理

給藥(yao)(yao)(yao)魚(yu)(yu)(yu)組(zu)分(fen)別(bie)于(yu)(yu)斑(ban)馬(ma)魚(yu)(yu)(yu)暴露(lu)藥(yao)(yao)(yao)液后0、1、2、4、6、8、12、18、24 h取藥(yao)(yao)(yao)液4 mL各(ge)2份，24 h將(jiang)魚(yu)(yu)(yu)取出，用(yong)純凈(jing)水(shui)迅速洗滌3次，殺掉，去除魚(yu)(yu)(yu)鰭和(he)魚(yu)(yu)(yu)磷，稱質量，于(yu)(yu)−70 ℃冰(bing)箱放置。各(ge)時間點斑(ban)馬(ma)魚(yu)(yu)(yu)藥(yao)(yao)(yao)液各(ge)2份分(fen)別(bie)混合，于(yu)(yu)−70 ℃冰(bing)箱放置。空白(bai)藥(yao)(yao)(yao)物組(zu)于(yu)(yu)斑(ban)馬(ma)魚(yu)(yu)(yu)暴露(lu)藥(yao)(yao)(yao)液后0、24 h時同法取樣(yang)。將(jiang)不同時間點取出的斑(ban)馬(ma)魚(yu)(yu)(yu)藥(yao)(yao)(yao)液冷凍干燥，殘(can)渣加(jia)0.5 mL甲醇(chun)溶(rong)解，過0.22 μm濾膜，濾液20 μL進行HPLC-MS分(fen)析(xi)。取24 h空白(bai)魚(yu)(yu)(yu)組(zu)和(he)給藥(yao)(yao)(yao)魚(yu)(yu)(yu)組(zu)斑(ban)馬(ma)魚(yu)(yu)(yu)，混合，剪碎，稱取1 g，加(jia)5 mL生理鹽水(shui)勻漿，用蜀(shu)科高速冷凍離心機3 500 r/min離心(xin)10 min，上清液(ye)(ye)(ye)用等(deng)體(ti)積醋酸乙酯萃取(qu)3次，合(he)并萃取(qu)液(ye)(ye)(ye)，氮氣吹干，殘渣加1 mL甲(jia)醇溶(rong)解制成1 g/mL的溶(rong)液(ye)(ye)(ye)，過0.22 μm濾(lv)膜，濾(lv)液(ye)(ye)(ye)20 μL進行HPLC-MS分(fen)析。

結果

組合物經斑(ban)馬魚作(zuo)用后，產生丹參(can)酮IIA和(he)隱丹參(can)酮的羥基化(hua)和(he)脫氫(qing)產物(wu)，未(wei)發現丹(dan)參酮I的代謝產物。

結論

斑馬魚對(dui)組(zu)合物(wu)的代(dai)謝與大鼠或鼠肝微(wei)粒體的代(dai)謝機(ji)制高度一致，提(ti)示斑馬魚對(dui)該組合(he)物的(de)代謝具合(he)理性，且具有(you)化合(he)物用(yong)量少(shao)、成本低(di)、簡(jian)單、等優(you)點，為斑馬(ma)魚(yu)用(yong)于復雜的(de)中藥體(ti)系代謝研究(jiu)提供依據。

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